Electrochemical magneto immunosensor based on endogenous ß-galactosidase enzyme to determine enterotoxicogenic Escherichia coli F4 (K88) in swine feces using square wave voltammetry.

Diseases caused by enterotoxicogenic Escherichia coli F4 (K88) (ETEC F4) are a problem in swine production establishments. Due to the high rate of mortality and morbidity of E. coli infections, a rapid and accurate diagnosis is important in order to choose an appropriate treatment to reduce the economic impact. Therefore, an electrochemical magneto-immunosensor (EMI) was developed to detect and quantify ETEC F4 in swine feces samples through a direct non-competitive immunoassay. ETEC F4 was selectively captured by immunomagnetic separation. The detection principle was based on the activity of ß-galactosidase endogenous enzyme (ß-gal), which hydrolyses the p-aminophenyl-ß-D-galactopyranoside (p-APG) producing p-aminophenol (p-AP), which was oxidized on a carbon screen printed electrode (CSPE) using square wave voltammetry (SWV). All parameters related to construction and electrochemical responses were optimized. The total analysis time to quantify ETEC F4 using the EMI was less than 2h and the limit of detection (LOD) was 33CFUmL-1. The perceptual relative error (%Er) was 20%. The magneto-immunosensor was validated versus conventional method of culture and plate count, obtaining a very good agreement. The EMI is simple, fast and economical to detect and quantify ETEC F4 in swine feces samples, being thus a valuable tool in swine production.

Farmacocinética y biodisponibilidad de ceftiofur sódico en caprinos / Pharmacokinetics and bioavailability of ceftiofur sodium in goats

Se determinaron parámetros farmacocinéticos de ceftiofur sódico con dosis única de 2.2 mg/kg por vía intravenosa e intramuscular, en un diseño cruzado de tratamiento en hembras caprinas adultas no gestantes (n= 6). Las concentraciones plasmáticas en función del tiempo se determinaron por el método microbiológico de difusión en agar utilizando medio Mueller-Hinton y Providencia alcalifaciens, cuyo límite de cuantificación se estableció en 0.039 μg/ml. Los datos de concentración plasmática de ceftiofur en función del tiempo se analizaron por el modelo farmacocinético no compartimental utilizando el sofwarePK Solution 2.0. Los parámetros obtenidos para la vía intravenosa fueron: vida media de eliminación (t1/2 b)= 1.63 ± 0.04 horas, clearance total (Cltot)= 3.3 ± 1.1 ml/kg/min, volumen de distribución (Vdss)= 0.38 ± 0.19 L/kg, área bajo la curva (ABC)= 716.5 ± 225.5 μg/min/ml. Estos valores no difieren significativamente de los obtenidos del ensayo intramuscular (p < 0.05) y son similares a los informados en otras especies animales con ceftiofur. En el ensayo intramuscular se obtuvo una concentración máxima (Cmáx) de 3.6 ± 0.5 μg/ml, con un tiempo máximo (tmáx) de 0.53 ± 0.31 horas y elevada biodisponibilidad (97.6 ± 0.1 por ciento). Los resultados indican que la aplicación intramuscular provee rápida absorción y óptima biodisponibilidad, generando niveles plasmáticos que exceden la concentración inhibitoria mínima (CIM) de patógenos respiratorios sensibles durante 12 horas. Considerando estos resultados y laCIM90 (£ 0.06 μg/ml) frente a bacterias como Pasteurella haemolitica y multocida, se propone como tratamiento de este tipo de cuadros infecciosos en caprinos, una dosis de mantenimiento de 1.3 mg/kg cada 12 horas por vía intramuscular, cuyo predictor de eficacia (t > CIM) se calculó en 77.8 por ciento.

Naturaleza y control de la quimiorresistencia en ectoparásitos / Nature and control of ectoparasite chemoresistance

En la actualidad, con trascendencia e intensidad variable, la resistencia se extiende a todos los ectoparásitos combatidos y comprende a todos los compuestos químicos disponibles condicionandoseriamente la efectividad. Es un fenómeno preadaptativo, heredable, originado de una mutación, por lo tanto su concepción es genética. La habilidad de supervivencia se difunde en una población determinada pues el principio activo excluye los individuos susceptibles, seleccionando en los sobrevivientes genes heredados por generaciones sucesivas. La resistencia se manifiesta por diferentes mecanismos, entre los cuales se destaca la penetración reducida, detoxificación incrementada omenor sensibilidad por el sitio blanco, no obstante ciertas características genéticas y biológicas del parásito que favorecen la expresión, son significativos los factores operacionales, inherentes al manejodel principio activo que favorecen la presión de selección, tales como el empleo de dosis elevadas, administraciones repetidas o de acción residual intrínseca, en consecuencia la prevención de la resistencia no sólo debe contemplar el monitoreo permanente de la susceptibilidad del parásito que se pretende controlar sino también es necesario adoptar medidas tendientes a reducir la presión de selección.

Farmacocinética de cefquinome en terneros por aplicación intramuscular / Cefquinome pharmacokinetics in calves by intramuscular administration

Se determinaron parámetros farmacocinéficos de cefquinome referidos a su absorción, distribución y eliminación, tras la aplicación intramuscular de 1 mg/kg a terneros de 34 ± 25 días de edad. Losniveles plasmáticos se cuantificaron mediante método microbiológico utilizando medio de cultivo Antibiotic Nº 1 (Merck) y Providencia alcalifaciens como microorganismo detector y mediante la preparación de nueve diluciones estándares (25 a 0.097 mg/ml). Se confrontaron los diámetros de los halos de inhibición de las muestras versus la dilución estándar, utilizando una curva de calibración obtenida por regresión semilogarítmica (r2= 0.989). El límite de cuantificación del ensayo fue de0.097 mg/ml. Los datos de concentración de cefquinome en función del tiempo fueron analizados con el software RESID e interpretados por el modelo bicompartimental (r2 = 0.9). Los resultados obtenidos son concordantes con el perfil cinético, exhibido por las cefalosporinas en los animales domésticos y lo informado para cefquinome en bovinos adultos e indican que la aplicación intramuscular produce rápida absorción y distribución, generando niveles plasmáticos máximos a las 0.85 ± 0.11 horas post aplicación, mientras que la difusión es restringida y breve la permanencia en el organismo, no obstante se comprobó niveles plasmáticos superiores a los terapéuticos que subsisten durante 6 horas post administración. Según los parámetros, farmacocinéticos obtenidos se estableció una dosis de mantenimiento de 1. 22 mg/kg de peso aplicados cada 24 horas por via intramuscular.

Ciprofloxacin increases hepatic and renal lipid hydroperoxides levels in mice.

Ciprofloxacin (CFX) is an effective and relatively safe antimicrobial used in a variety of human infections. However, adverse drug reactions and positive results in genotoxic tests are reported. In order to understand the possible pathophysiological mechanisms of the toxic effects informed for CFX, lipid hydroperoxides (LOOH) -oxidative mediators of peroxidation- were quantified in liver and kidney of mice, after 15 to 360 minutes of the ciprofloxacin administration at doses of 10 mg/Kg or 100 mg/Kg by i.p. route. The peroxidation in the lipid fraction was evaluated by measuring the amount of hydroperoxides through the oxidation of 1-naphthyldiphenylphospine into its oxide and further quantification by high performance liquid chromatography. The initial content of lipid hydroperoxides (nmol/g tissue) was 253 +/- 3 in kidney and 143 +/- 12 in liver. CFX induced the maximal variation to 728 +/- 101 in kidney (P < 0.05) and 315 +/- 31 in liver (P < 0.01), after 15 min of 100 mg/Kg single dose. The variation in the LOOH levels was significant in kidney with both doses used and in liver after 100 mg/Kg until 60 min after the CFX administration, and then gradually fell to natural levels. The results demonstrated the effect of CFX on lipid oxidation, an indicator of oxidative effect. A natural protective capacity against this oxidation, more efficient in liver than in kidney, was observed.

Ciprofloxacin increases hepatic and renal lipid hydroperoxides levels in mice.

Ciprofloxacin (CFX) is an effective and relatively safe antimicrobial used in a variety of human infections. However, adverse drug reactions and positive results in genotoxic tests are reported. In order to understand the possible pathophysiological mechanisms of the toxic effects informed for CFX, lipid hydroperoxides (LOOH) -oxidative mediators of peroxidation- were quantified in liver and kidney of mice, after 15 to 360 minutes of the ciprofloxacin administration at doses of 10 mg/Kg or 100 mg/Kg by i.p. route. The peroxidation in the lipid fraction was evaluated by measuring the amount of hydroperoxides through the oxidation of 1-naphthyldiphenylphospine into its oxide and further quantification by high performance liquid chromatography. The initial content of lipid hydroperoxides (nmol/g tissue) was 253 +/- 3 in kidney and 143 +/- 12 in liver. CFX induced the maximal variation to 728 +/- 101 in kidney (P < 0.05) and 315 +/- 31 in liver (P < 0.01), after 15 min of 100 mg/Kg single dose. The variation in the LOOH levels was significant in kidney with both doses used and in liver after 100 mg/Kg until 60 min after the CFX administration, and then gradually fell to natural levels. The results demonstrated the effect of CFX on lipid oxidation, an indicator of oxidative effect. A natural protective capacity against this oxidation, more efficient in liver than in kidney, was observed.